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然后在超净工作台上用75%酒精消毒30秒,0.1%升汞溶液表面消毒10 12分钟,最后用无菌水漂洗4 5次。 并置于培养室中培养,培养温度23 2 ,光照时间12小时/天,光照强度1500 2000lx。 2初代培养外植体在初代培养基(MS 3%蔗糖 0.8%琼脂,pH调至5.8)上培养7 10天,腋芽开始萌动、生长,40天后芽长1.5 2cm。 3继代培养将长1.5 2cm的无菌芽从诱导成功的原茎段上切下,接种到继代增殖培养基(MS 6-BA0 0.1mg/L NAA0 0.02mg/L)上。 经过40 50天的培养,从芽的基部可形成3 5个2 3cm高的丛生状不定芽。 然后将丛生芽切成1cm的小段(需带1个节),转移至相同成分的新鲜培养基上继代培养,发现在含NAA0.02mg/L的培养基中,随着6-BA浓度的提高(0、0.05、0.1mg/L),芽的发生率显著增加,分别为30%、258%、382%。 移植前,将培养40 50天、高4 5cm、具有3 6条根的试管苗置于自然条件下炼苗3天,取出生根小苗,仔细洗去根上附着的培养基,移植至大棚肥沃园土中,移植密度5 5cm。

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